四足離心機速率區(qū)應考慮哪些問題?
1、離心帶的穩(wěn)定性。
為了保證樣品帶的穩(wěn)定性,密度梯度液柱上的樣品量和濃度應合適。否則,樣品帶可能不穩(wěn)定,可能會產(chǎn)生趨勢和混亂,因此添加的樣品溶液密度應低于梯度頂部,即低于梯度密度。加樣量為密度液柱濃度小的1/10,如梯度加樣濃度為6%-20%(質量分數(shù))。如果分離膜中的顆粒,樣品必須溶解在0.25mo1/L蔗糖或其他滲介質中,以避免其膨脹。
因此,起始梯度密度應至少為0.35-0.4mol/L蔗糖。梯度重端密度應小于樣品的小顆粒密度。樣品濃度過高,區(qū)帶擴散嚴重,但樣品濃度過低,難以識別,找不到樣品區(qū)帶。
2、離心帶的寬度。
若起始區(qū)帶穩(wěn)定,由此區(qū)帶沉降的顆粒區(qū)帶基本穩(wěn)定。使用簡單的線性梯度。寬度樣品帶沿梯度沉降,區(qū)帶前緣受到的離心力大于后緣。因此,區(qū)帶往往會變寬,但前緣的顆粒也會遇到密度和a度較大的液體,而粘度和密度較大的作用往往會減緩沉降較快的顆粒。擴大區(qū)帶的離心力與縮小區(qū)帶的液體性質之間的平衡將取決于梯度的形狀和梯度物質的性質。如果區(qū)帶狹窄,顆粒形狀不隨密度梯度溶質濃度的變化而變化,則從下面給出距離旋轉中心。